怎樣保證原位雜交實驗操作時的溫度?
建議儀器操作，人工操作的話要注意：
（1）對熒光原位雜交操作過程中可能使用的一些儀器進行溫控檢查，不符合要求的進行更換。
（2）盡可能地保持環境溫度在20度以上。
（3）針對需要預熱以達到要求溫度的試劑，在使用前必須使用溫度計對其進行測溫。
（4）同時檢測的樣本不超過4塊，操作一定要迅速，實驗人員要注意一些小部件的溫度，尤其是在冬季。
一. 原位雜交天
1. 重新水化和固定
1） 吸取固定好的胚胎，加入50%的PBST溶液，放置5分鐘。
2） 置換成30％的PBST溶液，放置5分鐘
3） 置換成PBST溶液，放置5分鐘，重復一次
4） 置換成4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘
5） 用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。
蛋白酶處理與后固定（本實驗不做此步）
1） 用10ul/ml的蛋白酶K在室溫下處理胚胎。5體節以下的胚胎不處理，5體節到24小時的胚胎處理3分鐘，24小時以上的胚胎處理5分鐘或者更長。發育時間越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶處理，發育時間長的胚胎就需要用蛋白酶來疏松組織，以便于雜交。
2） 用PBST溶液輕洗，在PBST中放置5分鐘。
3） 用4％多聚甲醛的PBS溶液固定20分鐘，室溫。
4） 用PBST洗兩次，每次放置五分鐘，室溫。
植物組織原位雜交是一種重要的分子生物學技術，它可以用來研究植物基因的表達和調控。該技術利用DNA探針與目標組織中的RNA或DNA結合，從而確定目標基因的表達模式和位置。本文將介紹植物組織原位雜交的原理、步驟和應用。
原理
植物組織原位雜交的原理是利用DNA探針與目標組織中的RNA或DNA結合，從而確定目標基因的表達模式和位置。DNA探針是一段已知序列的DNA分子，可以與目標RNA或DNA的互補序列結合。在組織原位雜交中，DNA探針通常標記有熒光染料或性同位素，以便于檢測。
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